Elektroforeza w żelu DNA jest powszechną techniką biologii molekularnej stosowaną do rozdzielania i analizowania fragmentów DNA na podstawie ich wielkości. Proces polega na umieszczeniu fragmentów DNA o różnej wielkości na żelu wykonanym z agarozy, węglowodanu występującego w czerwonych algach.
Przygotowanie i odlewanie żelu agarozowego
- Rozpuścić agarozę w odpowiedniej ilości buforu do elektroforezy. Stężenie żelu określa się na podstawie stosunku masy do objętości, np. 1 g agarozy na 100ml buforu na 1% żel.
- Podgrzej mieszaninę w kuchence mikrofalowej, obracając pojemnik, aby zapewnić całkowite rozpuszczenie agarozy.
- Do roztworu żelu dodać bromek etydyny do końcowego stężenia 0,5mg/ ml. Bromek etydyny interkaluje pomiędzy sąsiednimi parami zasad DNA i emituje pomarańczową fluorescencję w świetle UV. Należy pamiętać, że bromek etydyny jest substancją rakotwórczą, dlatego obchodzenie się z nim wymaga odpowiednich środków bezpieczeństwa, takich jak noszenie rękawiczek.
- Ochłodzić roztwór żelu w łaźni wodnej, aby zapobiec wypaczeniu tacy żelowej pod wpływem wysokich temperatur.
- Umieścić grzebień w roztworze żelu, aby utworzyć dołki na próbki. Wybierz grzebienie odpowiednie do ilości pobieranej próbki DNA. Wlać roztwór żelu agarozowego dotacka na żeli pozostawić do zestalenia w temperaturze pokojowej.
- Gdy żel stwardnieje, usuń grzebień. Jeśli nie będziesz od razu używać żelu, zawiń go w folię i przechowuj w temperaturze 4℃ do czasu, aż będzie potrzebny.
Przygotowanie i uruchomienie żelu
Przed rozpoczęciem elektroforezy należy wymieszać próbkę DNA z buforem obciążającym. Bufor ładujący jest zwykle sześciokrotnie bardziej stężony i pomaga próbce opaść na dno dołków oraz śledzić ruch podczas elektroforezy.
Ustaw zasilacz na określone napięcie.
Dodaj wystarczającą ilość buforu do elektroforezy do zbiornika żelu, aby pokryć powierzchnię żelu.Zapewnićprawidłowe podłączenie elektrod.
Załaduj próbkę DNA i markery masy cząsteczkowej do dołków żelowych.
Włączyć zasilanie, aby rozpocząć elektroforezę.
Obserwacja oddzielonych fragmentów DNA
Po zakończeniu elektroforezy należy wyłączyć zasilanie i usunąć żel.
Do oświetlenia żelu użyj źródła światła UV; Fragmenty DNA będą widoczne jako pomarańczowe fluorescencyjne paski.
Udokumentuj obraz żelu w celu analizy oddzielonych fragmentów DNA.
Po zakończeniu doświadczenia należy zadbać o prawidłową utylizację żelu i buforu do elektroforezy, zgodnie z wytycznymi laboratorium. Podczas pracy z żelami i buforami zawierającymi bromek etydyny należy zawsze nosić rękawiczki, aby chronić przed narażeniem na tę niebezpieczną substancję.
Elektroforeza w żelu DNA jest szeroko stosowana w biologii molekularnej i badaniach genetycznych, między innymi do szacowania wielkości cząsteczek DNA, oddzielania fragmentów DNA, wykrywania mutacji genów i pobierania odcisków palców DNA. Jest to prosta i skuteczna technika eksperymentalna, która pomaga w zrozumieniu składu i właściwości próbek DNA.
Beijing Liuyi Biotechnology Co.Ltd, profesjonalny producent zajmujący się od 50 lat produktami do elektroforezy, oferuje szeroką gamę zbiorników do elektroforezy (komory/ogniwa) do elektroforezy żelowej, takich jak poziome zbiorniki do elektroforezy (komory/ogniwa) do elektroforezyDNAelektroforeza żelowa oraz pionowe zbiorniki do elektroforezy (komory/ogniwa) do elektroforezy w żelu białkowym. Tymczasem zapewnia również różne typy zasilaczy do elektroforezy, analizator ciemnej skrzynki szafkowej i transiluminator UV. Możesz wybrać zbiorniki do elektroforezy (komory/ogniwa) firmy Beijing Liuyi do pomiaru masy cząsteczkowej RNA i oddzielania RNA o różnych rozmiarach dla swojego laboratorium.
Tutaj to zrobimypolecićjeden typ modelu poziomego zbiornika do elektroforezy (komora/ogniwo).DYCP-31DN do wytworzenia i uruchomienia żelu.
Po uruchomieniu żelu możesz skorzystać z naszego modelu systemu obrazowania i analizy żeluWD-9413Bobserwować, analizować i robić zdjęcia żelu. Liuyi Biotech oferuje również transiluminator UV (analizator UV) do obserwacji żelu. Posiadamy model transiluminatora UV typu czarnej skrzynki (analizator UV).WD-9403A,9403C,WD-9403F, model przenośnego transiluminatora UV (analizatora UV).WD-9403Bi ręczny transiluminator UV (analizator UV)WD-9403Edla ciebie, wybierz.
Marka Beijing Liuyi ma ponad 50-letnią historię w Chinach, a firma może dostarczać stabilne i wysokiej jakości produkty na całym świecie. Przez lata rozwoju jest godny Twojego wyboru!
Obecnie poszukujemy partnerów, mile widziani są zarówno zbiorniki do elektroforezy OEM, jak i dystrybutorzy.
Jeśli masz plan zakupów naszych produktów, nie wahaj się z nami skontaktować. Możesz wysłać nam wiadomość na e-mail[e-mail chroniony]Lub[e-mail chroniony]lub zadzwoń do nas pod numer +86 15810650221 lub dodaj Whatsapp +86 15810650221 lub Wechat: 15810650221.
Czas publikacji: 8 sierpnia 2023 r