Elektroforeza żelowa jest jedną z głównych metod stosowanych w biologii molekularnej do analizy DNA.Metoda ta polega na migracji fragmentów DNA przez żel, gdzie są one rozdzielane na podstawie rozmiaru lub kształtu.Czy jednak kiedykolwiek napotkałeś jakiekolwiek błędy podczas eksperymentów z elektroforezą, takie jak rozmazane prążki na żelu agarozowym lub brak prążków na żelu?Jaka może być przyczyna tych błędów?
Nasi technicy podsumowali tutaj kilka sposobów rozwiązywania problemów w celach informacyjnych.
1. Rozsmarowane paski na żelu agarozowym
●DNA uległo degradacji.Unikaj zanieczyszczenia nukleazami.
● Bufor do elektroforezy nie jest świeży.Po wielokrotnym użyciu buforu do elektroforezy siła jonowa maleje, a wartość pH wzrasta, przez co pojemność bufora ulega osłabieniu, co wpływa na efekt elektroforezy.Zaleca się częstą wymianę buforu do elektroforezy.
● Zastosowano niewłaściwe warunki elektroforezy.Nie dopuszczać, aby napięcie przekroczyło 20 V/cm i podczas elektroforezy utrzymywać temperaturę <30°C.W przypadku elektroforezy gigantycznej nici DNA temperatura powinna wynosić <15° C. Sprawdź, czy bufor do elektroforezy ma wystarczającą pojemność buforową.
● Na żel nałożono zbyt dużo DNA.Zmniejsz ilość DNA.
● Za dużo soli w DNA.Aby usunąć nadmiar soli, należy zastosować wytrącanie etanolem.
● DNA zostało zanieczyszczone białkiem.Stosuj ekstrakcje fenolowe, aby usunąć białko w zaawansowanym stadium.
● DNA zostało zdenaturowane.Nie podgrzewać przed elektroforezą.Rozcieńczyć DNA w buforze z 20 mM NaCl.
2. Anomalie migracji prążków DNA
● Renaturacja miejsca COS fragmentu λHind III.Przed elektroforezą podgrzewać DNA przez 5 minut w temperaturze 65°C, a następnie chłodzić je w urządzeniu z lodem przez 5 minut.
● Zastosowano niewłaściwe warunki elektroforezy.Nie dopuszczać, aby napięcie przekroczyło 20 V/cm i podczas elektroforezy utrzymywać temperaturę <30°C.Sprawdź, czy bufor do elektroforezy ma wystarczającą pojemność.
● DNA zostało zdenaturowane.Nie podgrzewać przed elektroforezą.Rozcieńczyć DNA w buforze z 20 mM NaCl.
3. Słabe lub żadne prążki DNA na żelu agarozowym
● Na żelu załadowano niewystarczającą ilość lub stężenie DNA.Zwiększ ilość DNA.Elektroforeza w żelu poliakryloamidowym jest nieco bardziej czuła niż elektroforeza w agarozie, a obciążenie próbki można odpowiednio zmniejszyć.
● DNA uległo degradacji.Unikaj zanieczyszczenia nukleazami.
● DNA poddano elektroforezie na żelu.Elektroforyzuj żel krócej, użyj niższego napięcia lub użyj żelu o wyższej zawartości procentowej.
● Do wizualizacji DNA wybarwionego bromkiem etydyny użyto źródła światła o niewłaściwej mocy.Aby uzyskać większą czułość, użyj światła W o krótkiej długości fali (254 nm).
4. Brak prążków DNA
●DNA o małych rozmiarach poddano elektroforezie na żelu.Elektroforyzuj żel krócej, użyj niższego napięcia lub użyj żelu o wyższej zawartości procentowej.
● Trudne do rozróżnienia prążków DNA o podobnych cząsteczkach.Zwiększ czas elektroforezy i sprawdź stężenieżelu, aby upewnić się, że procent żelu zostanie wykorzystany w prawidłowy sposób.
● DNA zostało zdenaturowane.Nie podgrzewać przed elektroforezą.Rozcieńczyć DNA w buforze z 20 mM NaCl.
● Nici DNA są ogromne i konwencjonalna elektroforeza żelowa nie jest odpowiednia.Analiza impulsowej elektroforezy żelowej.Jakie inne problemy miałeś podczas elektroforezy w żelu agarozowym?W przyszłości poszukamy więcej informacji na temat przewodników.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) to wyspecjalizowana firma skupiająca się na produktach związanych z elektroforezą w Chinach.Jej historia zaczyna się w 1970 r., kiedy Chiny nie weszły jeszcze w czas reform i otwarcia.Przez lata rozwoju, Liuyi Bitotech posiada własną markę, która jest znana jako marka Liuyi na krajowym rynku produktów do elektroforezy.
Marka Liuyi ma ponad 50-letnią historię w Chinach, a firma może dostarczać stabilne i wysokiej jakości produkty na całym świecie.Dzięki wieloletniemu rozwojowi jest godny Twojego wyboru!
Poziome ogniwa do elektroforezy (zbiorniki/komory) firmy Liuyi Biotech charakteryzują się wysoką jakością i dobrym wyglądem.Dzięki różnym rozmiarom tacek żelowych mogą one spełniać różne wymagania eksperymentalne.Posiadamy własny zespół techniczny i fabrykę.Od projektu po produkcję, od surowców po kluczowe części, możemy kontrolować cały proces.Seria DYCP 31 przeznaczona jest do elektroforezy DNA, które stanowią modelDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, IDYCP-31E.Różnice między nimi to wielkość żeli i cena.Naszym klientom zapewniamy pełną rozmiarówkę produktów.ModelDYCP-32Cmoże wyprodukować największy żel 250 mm * 250 mm.
Tymczasem polecamy nasz zasilacz do elektroforezyDYY-6C,DYY-6DIDYY-10Cdo naszych ogniw do elektroforezy (zbiorniki/komory) serii DYCP-31 i 32.
Jeśli chcesz uzyskać więcej informacji na temat produktów, odwiedź tę witrynę, aby uzyskać więcej. Zachęcamy do skontaktowania się z nami za pośrednictwem poczty elektronicznej, aby poinformować nas, czego chcesz i sprawdzić, czy możemy zapewnić Ci rozwiązania.
Aby uzyskać więcej informacji o nas, prosimy o kontakt e-mailowy[e-mail chroniony], [e-mail chroniony].
Czas publikacji: 9 maja 2022 r